“邊緣效應(yīng)”是指在利用96孔板進行細胞培養(yǎng)時，細胞在孔板中的位置會影響細胞的生長狀態(tài)，尤其是處在周邊及四個角的孔中細胞通常會表現(xiàn)出分布不均的現(xiàn)象。
出現(xiàn)“邊緣效應(yīng)”的原因主要有兩方面：
1. 溫度效應(yīng)：經(jīng)研究證實在溫育中的熱力學梯度可能是根本原因。孔板的聚苯乙烯本身為不良熱導體，在實驗室的常規(guī)ELISA測定中，將板從室溫（通常在25℃左右）置于37℃溫箱，板也升溫時，在外周孔與中心孔之間可能存在一熱力學梯度。
2. 蒸發(fā)效應(yīng)：雖然通常細胞培養(yǎng)箱中都會放置一盤雙蒸水以維持培養(yǎng)箱中的濕度，但仍難達到多孔板中的濕度，特別是在培養(yǎng)箱經(jīng)常開關(guān)的情況更是如此。由于位置效應(yīng)，邊緣孔的濕度較中間孔更低，水分揮發(fā)的現(xiàn)象就更為嚴重。這樣就容易造成四周培養(yǎng)基的體積會明顯少于中間孔，而四個角落的孔尤為嚴重。
所以我們在鋪96孔板的時候，一般外圍這一圈是加PBS，中間的60個孔才加細胞。
細節(jié)決定成敗，細胞鋪板看似簡單，實則需要耐心、細致的操作。當然，熟能生巧，相信你多鋪幾塊板，自己也能總結(jié)出自己的經(jīng)驗。
*以上均來源于網(wǎng)絡(luò)
